Виды и техники окрашивания волос — Сеть салонов красоты Naturel Studio

Оттенок волос может радикальным образом изменить ваш внешний вид, причём независимо от выбранной колористом техники окрашивания. Именно по этой причине для столь серьёзного изменения стиля стоит подготовиться заранее. Ниже описаны все основные техники окрашивания.

Вдохновение для выбора стиля окрашивания

Придумать, какие цвета сочетать для вашей новой причёски можно самостоятельно, перебрав несколько уже известных вариантов. Однако ещё больше вариантов находят в социальных сетях, ведь именно там модницы и модники делятся со своими друзьями и подписчиками новостями из своей жизни. В любом случае быть в тренде и знать о последних веяниях моды никогда не помешает. Полистав странички с последними постами Инстаграма, вы получаете возможность наткнуться на оригинальный стиль окрашивания.

Стильные, модные техники окрашивания

Сейчас самыми модными техниками окрашивания являются всевозможные естественные виды мелирования, контрастные окрашивания. Они добавляют волосам видимого объёма и создают многогранную разноцветную палитру на локонах.

Балаяж

Несмотря на то, что техника балаяж-мелирования сейчас только осваивается модницами, она была популярна ещё в восьмидесятых годах. Особенность этого вида окрашивания: подбор цветовых переливов осуществляется индивидуально для каждого клиента с учётом длины волос, овала лица, формы стрижки, а также тона кожи. Интересно, что мастер-колорист наносит краску либо осветлитель в данном случае с помощью кисти свободным методом, то есть так, как он считает нужным. В результате корни остаются натуральными, а на остальной части волос играют тёмные и светлые блики.

Неоспоримым «плюсом» этого окрашивания является натуральность цвета корней, так как при отрастании разницы не видно. При этом можно добавить и смешать оттенки в любое время, сделав внешне волосы ещё более густыми.

Шатуш

Шатуш – это техника окрашивания, которая производится с помощью начёсывания локонов. Внешне она очень похожа на предыдущий вариант. Особенностью является неравномерное нанесение краски, что создаёт эффект естественного цвета с мягкими, деликатными переходами. Начёсывание позволяет переходить от балаяжа к шатушу, а также помогает избегать «полосатого» эффекта.

Вывод: если вы хотите натуральный эффект слегка выгорающих на солнце волос с естественным цветом корней, выбирайте шатуш.

Омбре

Техника омбре-мелирования отличается резким и ярким переходом от тёмного цвета у корней к светлому на кончиках волос. Специалисты также называют этот вид окрашивания «растяжкой цвета» или градиентом. Эффектнее всего омбре выглядит на шевелюре из длинных волос, хотя средней длины локоны также подвергают такой покраске. Вариантов перехода масса: не обязательно делать чёрно-белые оттенки, можно поэкспериментировать, выбрав светло-розовый и мятный оттенки.

Мраморное окрашивание

Если радикальное осветление пока ещё пугает вас, мраморное окрашивание подойдёт, так как второстепенный оттенок (в отличие от главного) наносят всего лишь в нескольких местах. Главное – выбрать оба оттенка краски из одной цветовой палитры. В итоге получается как бы разложение одного цвета на несколько оттенков. Выгоднее всего мраморное окрашивание выглядит на не очень светлых или тёмных волосах, хотя жгучие брюнетки и светлые блондинки тоже могут удачно осуществить эксперимент «мраморной покраски» при обращении к специалистам Naturel Studio. Они выполнят деликатный рисунок, без видимых переходов, как это бывает при обыкновенном мелировании.

Какие цвета выбирают современные модницы

Разброс оттенков и цветов красок для волос поражает воображение, но как подобрать самые модные и подходящие именно вам оттенки? Конечно, наиболее смелые в самовыражении красавицы выбирают яркие, кричащие цвета краски.

Холодные оттенки для окрашивания волос

По прежнему в этом году актуальны стальные, металлические нотки на локонах, ведь они выглядят строго и выгодно оттеняют, обрамляют лицо. Проще всего приобрести желаемый светлый холодный оттенок блондинкам и девушкам, имеющим от природы нетёмный тон волос: в таком случае травмироваться и высушиваться волосы будут минимально. Однако брюнетки также могут осуществить полное изменение цвета у профессионального колориста.

Тёплые тона и оттенки для вашей шевелюры

Так называемые тёплые оттенки являются наиболее естественными, в отличие от вышеописанных холодных металлических цветов. Именно по указанной причине у естественного «тёплого» окрашивания очень много поклонников. Удачно подобранный цвет сможет выгодно оттенить волосы изначально рыжих, светловолосых или тёмноволосых дам.

На окрашивании «тигровый глаз» стоит остановиться более подробно. Название этого способа создания стиля происходит от природного минерала, имеющего золотистый оттенок и коричневатые полосочки. Чаще всего такое окрашивание делают темноволосые девушки, но на светловолосых «тигровый глаз» также будет отлично смотреться. При этом одинаково привлекательно будут переливаться оттенками после покраски вьющиеся, прямые, короткие, длинные локоны.

Так как данный вид парикмахерского преображения не выходит в своей цветовой гамме за пределы естественных оттенков, он будет естественно смотреться, значит, останется модным ещё долгое время. Обновление (подкрашивание) для такого варианта покраски нужно производить не чаще одного раза в два месяца, поэтому «тигровый глаз» является щадящим методом изменения внешности, не приносящим большого вреда волосам и их структуре.

Радужное окрашивание

Потрясающий эффект можно получить, применив популярное и очень презентабельное радужное окрашивание. Оно характеризуется смелыми, хотя вместе с тем плавными, интригующими переходами от одного интересного цвета к другому. Используются розовые, зелёные, синеватые и другие смелые оттенки. При отсутствии возможности сделать полноцветную радугу на волосах (например, при наличии строгих правил по дресс-коду на работе) можно сделать так называемое скрытое радужное мелирование, которое становится видно только при определённом расположении пробора. Ещё одним вариантом окрашивания в описываемом стиле является частичная покраска радужных прядей возле лица для более чёткого обрамления причёски.

Сейчас модно окрашивать волосы во все цвета радуги одновременно, поэтому не бойтесь создать столь смелый, но запоминающийся образ. Комбинировать и придумывать подходящий набор оттенков – это работа профессионального колориста нашей студии. При этом стоит помнить, что сделать радужное мелирование может любая девушка, но светловолосым проще придать все нужные оттенки. Темноволосые также могут украсить себя «радугой», просто на данную процедуру скорее всего уйдёт немного больше времени, чем на создание такого же лука для блондинки или русоволосой, так как профессиональные красящие составы проявятся в полную силу именно на природных светлых локонах.

Пастельное мелирование

Окрашивание не обязательно должно иметь яркие оттенки. Для тех, кто любит более умеренные цвета на своих локонах подойдёт пастельное окрашивание. Оно характеризуется приглушёнными, неяркими тонами, которые могут в разном порядке чередоваться на ваших кудрях. Лучше всего сделать плавный переход от корней к кончикам. В таком случае постоянно корректировать причёску не придётся, так как палитра цветов и так будет играть разноцветными мягкими бликами на волосах. При этом цвета и оттенки на основной массе волос можно менять на своё усмотрение, тем более, что пастельные оттенки (в отличие от «кричащих» тонов) будут вымываться быстрее. На пике популярности находятся окрашивания в виде градиента, начинающегося у корней с яркого тёмно-фиолетового цвета, заканчивающегося у кончиков волос на нежно-розовом оттенке.

Окрашивание, которое не отличить от натурального цвета

Вместе с явно искусственными цветами и радуги на волосах не менее модным считается покраска шевелюры в такие естественные тона, что разницу между клиенткой салона красоты и девушкой с естественно выгоревшими на солнце волосами заметить невозможно.

Если вам по душе натуральный цвет волос или надоели эксперименты с цветом шевелюры, обратитесь к опытному колористу для придания второй жизни оттенку локонов. Мастер подберёт несколько оттенков, максимально приближённых к вашему натуральному собственному цвету и буквально нарисует блики, игру света на локонах и отдельных прядках. Такая работа является максимально творческой и поэтому единой схемы для выполнения естественного окрашивания нет.

Брондирование

Брондирование является одновременно экономным способом окрашивания в более светлые оттенки, то есть осветления волос, а также данный метод считается относительно новым и модным вариантом изменения повседневного лука. В результате после бронда корни остаются тёмными, а остальная масса волос немного осветляется. Получается, что омбре очень сходно с брондированием, но всё же отличия имеются: наиболее светлый оттенок при омбре-мелировании отличается всего на пару тонов от самого тёмного в причёске, чего нельзя сказать про омбре.

Светловолосые девушки тоже могут сделать себе бронд. Это возможно только в том случае, если цвет волос натуральный. В случае искусственного осветления брондирование может иметь совершенно неожиданные результаты. Прекрасно указанный вид мелирования выглядит на пшеничного цвета локонах, а также на русых волосах.

В какой цвет краситься блондинкам, брюнеткам и рыжим?

По большому счёту вы можете выбирать практически любой цвет для изменения образа, особенно при обращении к опытному колористу. Однако лучше придерживаться определённых правил при выборе оттенка.

Какой цвет подойдёт брюнеткам?

В первую очередь девушки с тёмным цветом волос должны рассмотреть вариант покраски, называемый «тигровым глазом». Это выглядит интересно и совершенно нескучно, ведь теперь в причёске всегда будут «играть» янтарные переливы. При выборе «глаза» для окрашивания не придётся слишком сильно осветлять волосы. Такие особенные виды мелирования, как шатуш, балаяж или омбре также подойдут тёмноволосым. При этом помните:

  • если нужны более светлые корни и уникальный рисунок, выбирайте балаяж;
  • когда требуется небольшое естественное осветление, обратите внимание на шатуш;
  • если же вам нравится градиент-цвет, красьтесь с помощью техники омбре.

Брондирование также подойдёт тем, кто не решился окрашиваться в радикальный блонд, но изменить что-то в оттенке волос хочет. Ещё вариант: горизонтальная растяжка цвета.

Блондинки и мелирование

Девушки со светлыми волосами могут рассмотреть вариант мраморного окрашивания. Оно будет прекрасно выглядеть, особенно при регулярном поддержании цвета специальным оттеночным шампунем (избавляет от нежелательной желтизны). Эффект выгоревших волос создаётся для блондинок с помощью шатуш-мелирования. Использование современного метода окрашивания, называемого бондингом, обеспечит безопасность локонов. Омбре – ещё один яркий способ для блондинок обновить и улучшить свой образ.

Какие окрашивания выбирают русоволосые девушки

Щадящее осветление в виде шатуш-мелирования рекомендуется специалистами для девушек и женщин, имеющих русый цвет волос. Такой вариант покраски будет отлично выглядеть за счёт миксования различных оттенков на локонах. Мраморное окрашивание также подходит, но очень внимательно стоит выбирать основной, то есть базовый цвет. Важно понять, какой оттенок подходит больше: холодный или тёплый.

Для русоволосых с целью придания максимальной натуральности шевелюре и её цвету предпочтительней в большинстве случаев всё-таки тёплый тон, если ваш русый не является холоднооттеночным. То же правило надо соблюдать при частичном окрашивании для того, чтобы все цвета правдоподобно выглядели при распущенных волосах. При выборе холодных оттенков, если ваш натуральный является тёплым, придётся чаще окрашивать отрастающие корни.

 

 

 

«Мы любим блонд» мелирование и окрашивание волос от Goldwell

Невероятные, изысканные, стильные оттенки блонд! 4 новых варианта окрашивания волос, эксклюзивно от GOLDWELL

Опытные колористы салона «Маяк» придадут вашим волосам один из четырех новых роскошных оттенков блонд, предложенных компанией GOLDWELL. Оттенки будут достигнуты при использовании только самых лучших красок: Nectaya, Topchic, Elumen а также уникального осветления волос silk lift.

Волосы будут выглядеть ухоженными и здоровыми, а их цвет заставит окружающих глядеть на вас с восхищением.

Мы любим блонд, поэтому с удовольствием сделаем вас роскошной блондинкой. Осмельтесь блистать!

Первый вариант окрашивания, Naturally Blonde или «Натуральный блонд» — это сияние и блеск волос. Это  цвет, похожий на цвет шевелюры светловолосого ребенка. Он сочетает холодные и теплые тона, чистый, вызывающий ощущение невинности, яркости, оптимизма. «Солнышко» — так захочется сказать про обладательницу волос этого оттенка.

Второй вариант окрашивания, Sun-Kissed Blonde — «Поцелуй солнца или солнечный блонд»обеспечивает эффект слегка выгоревших на солнце волос. Игра светлых и темных оттенков блонд, переливы блестящих локонов сделают вас знойной «летней» блондинкой в любое время года.

Третий вариант окрашивания, Nordic Blonde — «Северный блонд». Волосы будут переливаться серебристыми, чисто белыми, платиновыми тонами, а их блеск будет напоминать мерцание таинственного и нежного лунного света. С волосами, окрашенными в Nordic Blonde, вы будете настоящей снежной королевой.

Четвертый вариант окрашивания, Honey Blonde, «Медовый блонд» — мягкий переход от натурального цвета волос к теплому и притягательному медовому оттенку. Выглядит естественно, но в то же время очень привлекательно и красиво!

«Мы любим блонд» — это новая концепция окрашивания и осветления волос, включающая с себя консультацию, подбор подходящих исключительно вам окрашивающих средств и техник, создание индивидуального восхитительного оттенка и забота о здоровье и блеске волос.

Эксперты GOLDWELL, работающие в московском салоне красоты «Маяк», выберут подходящее именно для вас модное окрашивание волос, порекомендуют средства для ухода и укладки, чтобы восхитительный блонд оттенок сохранился надолго.

У нас можно не только великолепно окрасить волосы, но и сделать стрижку, укладку, выпрямление волос или наоборот, химическую завивку. Записывайтесь по телефону +7 (495) 517-50-31 или приходите по адресу Москва, ул. Тверская 29/2. Мы по доступным ценам предлагаем весь спектр процедур для вашей красоты и ухода за волосами. И с удовольствием повторим еще раз:

Мы любим блонд!

Упс ! Страница не найдена !

Коллекция весна-лето

Коллекция осень-зима

Backstage осень-зима

Backstage весна-лето

Немного об американских техниках окрашивания волос

Ни для кого не секрет, что в последнее время все самые востребованные и наиболее модные окрашивания приходят из США. Это связано с многими факторами, в том числе и максимальное нахождение звезд Голливуда в этой стране. Поэтому требования к американским колористам несколько более высокие, тк некоторые из них, работая со звездами, задают «ритм» и тренд целому направлению.

Достаточно вспомнить, как несколько лет назад внедрялось брондирование?!

Когда Скарлет Йоханссон вышла на премьере фильма «ВИКИ, КРИСТИНА, БАРСЕЛОНА» с эффектом отросших корней, только самый ленивый не писал, что ей не хватило денег на окрашивание. Но прошло совсем немного времени, и теперь очень многие являются приверженцами данного эффекта, а в общедоступном названии эта техника известна как брондирование. И надо отдать должное за последние 5 лет в России огромное количество женщин отдает предпочтение именно этой технике окрашивания волос, а мастера из разных регионов приезжают и с удовольствием осваивают данную технику, понимая ее востребованность.

Брондирование – американская техника, разработанная ведущими колористами США

Тоже самое произошло и с техникой окрашивания волос ОМБРЕ. Несмотря на французский оттенок этого названия, сама техника окрашивания так же пришла из США и сейчас пользуется невероятным спросом в России.

Нынешние форматы блондирования типа «блонд» и «блюр», так же корнями уходят в разработку американских колористов. Окрашивание выполненное через начесы и специфической формой «рисования» кисточками на волосах.

Совсем недавно Мария Мельникова представила мастерам две новые техники окрашивания волос по типологии мелирования, но оно кардинальным образом отличается от классического понимания мелирования. Техника окрашивания волос, которую Мария назвала «Американский блонд» и вторая техника сложного окрашивания волос «Американское мелирование» это виды окрашивания, которые позволят создавать максимально востребованные сейчас блонды, с минимальными трудозатрами и самое главное с минимальным количеством потраченного колористом времени.

Итак, колористы. Новые техники, на которые Вам обязательно стоит обратить внимание – АМЕРИКАНСКИЙ БЛОНД и Американское мелирование уже в Академии колористики Марии Мельниковой.

И как обычно несколько впечатляющих фото )

Анализ структуры пятен крови: принципы

Принципы анализа образцов пятен крови

Чтобы понять, как аналитики интерпретируют пятна крови, нужно сначала понять основные свойства крови. Кровь содержит как жидкие (плазма и сыворотка), так и твердые вещества (эритроциты, лейкоциты, тромбоциты и белки). Кровь находится в жидком состоянии, когда находится внутри тела, и когда она выходит из тела, она делает это в жидком состоянии. Но, как знает любой, у кого были порезы или царапины, он недолго остается жидким.За исключением людей с гемофилией, кровь начинает свертываться в течение нескольких минут, образуя темное блестящее гелеобразное вещество, которое со временем становится все более твердым. Наличие кровяных сгустков в пятнах крови может свидетельствовать о том, что приступ был затяжным, либо о том, что у пострадавшего какое-то время после травмы было кровотечение.

Кровь может выходить из тела разными путями, в зависимости от типа нанесенной травмы. Он может течь, капать, брызгать, струиться, хлестать или просто сочиться из ран.

Типы пятен

Пятна крови подразделяются на три основных типа: пассивные пятна, пятна переноса и пятна от удара.Пассивные пятна включают капли, потоки и лужи и обычно возникают в результате действия силы тяжести на травмированное тело. Пятна от переноса возникают в результате контакта объектов с существующими пятнами крови и оставляют после себя салфетки, салфетки или переносы узоров, такие как кровавый отпечаток обуви или пятно от тела, которое волочат. Пятна от ударов возникают в результате попадания крови в воздух и обычно выглядят как брызги, но могут также включать струи, брызги и артериальные выбросы.

Пассивное пятно крови на деревянной половице.(Любезно предоставлено John Black, Ron Smith & Associates)

Перенос рисунка, сделанный окровавленной рукой. (Любезно предоставлено John Black, Ron Smith & Associates)

Брызги крови классифицируются как ударные брызги (возникающие при приложении силы к источнику жидкой крови) или разбрызгиваемые брызги (вызванные артериальным выбросом, выдыхаемой брызгой или брызгами, отбрасываемыми от предмета). Характеристики брызг крови зависят от скорости, с которой кровь покидает тело, и типа силы, приложенной к источнику крови.

Огнестрельные брызги – включает как брызги вперед из выходного отверстия, так и брызги назад из входного отверстия. Разбрызгивание огнестрельного оружия будет варьироваться в зависимости от калибра оружия, места поражения жертвы, выхода пули из тела, расстояния между жертвой и оружием и местоположения жертвы относительно стен, пола и предметов. Как правило, брызги вперед представляют собой мелкий туман, а брызги назад крупнее и содержат меньше капель.

Обратные брызги от огнестрельного ранения на рулевом колесе.(Любезно предоставлено John Black, Ron Smith & Associates)

Отторжение — результат, когда объект, качающийся по дуге, проливает кровь на близлежащие поверхности. Это происходит, когда нападавший отбрасывает окровавленный предмет назад, прежде чем нанести еще один удар. Аналитики могут определить направление ударяющего объекта по форме брызг (хвосты указывают в направлении движения). Подсчет дуг также может показать минимальное количество нанесенных ударов.

Образцы брызг от трубки и бильярдного кия.(Предоставлено Брайаном Дью, Рон Смит и партнеры)

Артериальный спрей – выброс крови при разрыве крупной артерии. Кровь выбрасывается из поврежденного кровеносного сосуда за счет работы сердца и часто образует дугообразный узор, состоящий из больших отдельных пятен, с новым узором, создаваемым каждый раз, когда сердце сокращается.

Выдыхаемые брызги – обычно вызываются кровью от внутреннего повреждения, смешивающейся с воздухом из легких, выбрасываемым через нос, рот, или повреждением дыхательных путей или легких.Выдыхаемые брызги имеют тенденцию образовывать очень мелкий туман из-за давления, оказываемого легкими, выталкивающими воздух из тела. Маленькие пузырьки воздуха в каплях крови обычно обнаруживаются в этом типе брызг.

Некоторые пятна крови скрыты, то есть их невозможно увидеть невооруженным глазом. Исследователи могут использовать химические реагенты, такие как Luminol , чтобы найти и сфотографировать скрытые пятна крови. При распылении на кровь Luminol создает ярко-синее люминесцентное свечение, реагируя с железом в гемоглобине крови.

Люминол выявляет скрытые пятна крови, оставленные на раковине. (Любезно предоставлено John Black, Ron Smith & Associates)

События кровопролития

На месте преступления, где были нанесены телесные повреждения, вероятно, присутствует некоторое количество следов крови; однако сумма будет варьироваться в зависимости от обстоятельств преступления. Тип нанесенной травмы и величина примененной силы будут определять объем и структуру пятен крови:

  • Травмы острыми предметами (колющие) – эти травмы наносятся предметом с относительно небольшой площадью поверхности, например ледорубом или ножом.На инструменте остается меньше крови, что приводит к более мелкому и линейному рисунку пятен.
  • Травмы тупым предметом (удары или побои) – предметы, вызывающие травмы такого типа, обычно крупнее, например бита или молоток. Если объект соприкасается с жидкой кровью, большая площадь поверхности соберет больше крови, образуя капли разного размера.
  • Огнестрельные ранения – брызги в виде тумана, возникающие при попадании и выходе пуль из тела.

Интерпретация моделей

При воздействии на кровь капли разлетаются по воздуху.Когда эти капли ударяются о поверхность, форма пятна меняется в зависимости от угла падения, скорости, пройденного расстояния и типа поверхности, на которую воздействует капля. Как правило, форма пятна варьируется от круглой до эллиптической, с хвостами или шипами, идущими в направлении движения. Пятна-сателлиты меньшего размера также могут отделиться от первоначальной капли. Измерив ширину и длину пятна, можно рассчитать угол падения, что поможет следователям определить действия, которые могли иметь место на месте происшествия.

При изменении угла удара меняется и внешний вид образовавшегося пятна. Капля крови, ударившаяся о гладкую поверхность под углом 90°, приведет к образованию почти круглого пятна; удлинение незначительно, а шипы и сателлиты довольно равномерно распределены по внешней стороне капли. Ниже 75° шипы начинают становиться более заметными на стороне брызг, противоположной углу падения. По мере уменьшения угла падения пятно от брызг удлиняется, становится более эллиптическим, появляются шипы и т., становятся более преобладающими против угла удара. Под очень малыми (острыми) углами один спутник может отколоться, образовав второе пятно; это характерное пятно с восклицательным знаком.

Образцы Пустоты

Пустота возникает, когда человек или объект преграждает путь крови. Они важны, потому что пустоты могут показать следователям, отсутствуют ли объекты на месте происшествия, где находился человек или люди во время инцидента и было ли перемещено тело. Объект, который оставляет пустоту в узоре пятна крови, будет иметь соответствующий узор пятна крови на своей поверхности, что позволит аналитикам заменить его в сцене, если он будет найден.Образцы пустоты наиболее полезны для определения положения жертвы (жертв) и нападавшего (нападавших) в пределах сцены.

Вернуться к началу страницы ▲

Дифференциальные методы окрашивания – микробиология: лабораторный опыт

Просмотр бактериальных клеток

Микроскоп является очень важным инструментом в микробиологии, но существуют ограничения, когда дело доходит до его использования для наблюдения за клетками вообще и бактериальными клетками в частности. Двумя наиболее важными проблемами являются разрешение и контрастность.Разрешение — это ограничение, с которым мы ничего не можем поделать, поскольку большинство бактериальных клеток уже приближаются к пределу разрешения большинства световых микроскопов. Контрастность, однако, может быть улучшена либо с помощью другого типа оптической системы, такой как фазово-контрастный или дифференциально-интерференционно-контрастный микроскоп, либо путем окрашивания клеток (или фона) хромогенным красителем, который не только добавляет контраст, но и дает им тоже цвет.

В микробиологии используется множество различных красителей и процедур окрашивания.Некоторые из них включают одно окрашивание и всего несколько шагов, в то время как другие используют несколько окрашиваний и более сложную процедуру. Прежде чем приступить к процедуре окрашивания, клетки необходимо смонтировать (размазать) и зафиксировать на предметном стекле.

Бактериальный мазок — это просто небольшое количество культуры, нанесенное очень тонкой пленкой на поверхность предметного стекла. Чтобы предотвратить вымывание бактерий на этапах окрашивания, мазок можно химически или физически «фиксировать» на поверхности предметного стекла.Термофиксация — это простой и эффективный метод, который достигается путем кратковременного пропускания предметного стекла через пламя горелки Бунзена, в результате чего биологический материал более или менее постоянно прикрепляется к поверхности стекла.

Мазки, зафиксированные нагреванием, готовы к окрашиванию. При простом окрашивании к мазку добавляются красители, которые либо притягиваются за счет заряда (катионный краситель, такой как метиленовый синий или кристаллический фиолетовый), либо отталкиваются за счет заряда (анионный краситель, такой как эозин или тушь). Катионные красители связывают бактериальные клетки, что хорошо видно на ярком фоне.Анионные красители отталкиваются клетками, поэтому клетки ярко светятся на окрашенном фоне. См. рисунки 1 и 2 для примеров обоих.

Рисунок 1. Отрицательное окрашивание Cyptococcus neoformans , инкапсулированных дрожжей. Рисунок 2. Положительная окраска Staphylococcus aureus.

Вероятно, наиболее важным признаком, который становится очевидным при окрашивании бактериальных клеток, является их клеточная морфология (не путать с колониальной морфологией, которая представляет собой появление бактериальных колоний на чашке с агаром).Большинство гетеротрофных и культивируемых бактерий имеют несколько основных форм: сферические клетки (кокки/кокки), палочковидные клетки (бациллы/бациллы) или палочковидные клетки с изгибами или изгибами (вибрионы и спириллы соответственно). Существует большее разнообразие форм среди архей и других бактерий, обитающих в экосистемах, отличных от человеческого тела.

Часто бактерии создают специфические расположения клеток, которые образуются в результате бинарного деления бактерий при их размножении. Механизмы особенно очевидны для неподвижных бактерий, потому что клетки имеют тенденцию оставаться вместе после завершения процесса деления.И форма, и расположение клеток являются характеристиками, по которым можно различать бактерии. Наиболее часто встречающиеся формы бактерий (кокки и бациллы) и их возможное расположение показаны на рисунках 3 и 4.

Рисунок 3. Возможное расположение бактериальных клеток кокков. Рисунок 4. Возможное расположение бактериальных клеток для бацилл

Дифференциальные методы окрашивания

В микробиологии методы дифференциального окрашивания используются чаще, чем простое окрашивание, как средство сбора информации о бактериях.Методы дифференциального окрашивания, которые обычно требуют более одного окрашивания и нескольких стадий, называются таковыми, потому что они позволяют дифференцировать типы клеток или клеточные структуры. Наиболее важным из них является окраска по Граму. Другие дифференциальные методы окрашивания включают окрашивание эндоспор (для выявления бактерий, образующих эндоспоры), кислотоустойчивое окрашивание (для отличия видов Mycobacterium от других бактерий), метахроматическое окрашивание для выявления гранул запаса фосфата и окрашивание капсулы (для выявления инкапсулированные бактерии).Мы будем выполнять процедуры окрашивания по Граму и эндоспор в лаборатории и просматривать подготовленные слайды, которые подчеркивают некоторые другие клеточные структуры, присутствующие в некоторых бактериях.

Окрашивание по Граму

Рисунок 5. Бактерии, окрашенные по Граму.

В 1884 году врач Ганс Кристиан Грам изучал этиологию (причину) респираторных заболеваний, таких как пневмония. Он разработал процедуру окрашивания, которая позволила ему идентифицировать бактерию в легочной ткани, взятой у умерших пациентов, как этиологический агент фатальной пневмонии.Хотя метод окрашивания по Граму мало помог в лечении болезни, метод окрашивания по Граму значительно облегчил диагностику причины смерти человека при вскрытии. Сегодня мы используем методы окрашивания по Граму, чтобы помочь в идентификации бактерий, начиная с предварительной классификации в одну из двух групп: грамположительные или грамотрицательные .

Дифференциальный характер окраски по Граму основан на способности некоторых бактериальных клеток сохранять первичную окраску (кристаллический фиолетовый), сопротивляясь процессу обесцвечивания.Окрашивание по Граму включает четыре этапа. Сначала клетки окрашивают кристаллическим фиолетовым, а затем добавляют закрепитель красителя (йод). Затем применяется спирт, который избирательно удаляет окраску только с грамотрицательных клеток. Наконец, добавляется вторичный краситель, сафранин, который контрастно окрашивает обесцвеченные клетки в розовый цвет.

Хотя Грам в то время этого не знал, основное различие между этими двумя типами бактериальных клеток заключается в их клеточных стенках. Стенки грамотрицательных клеток имеют внешнюю мембрану (также называемую оболочкой), которая растворяется во время промывки спиртом.Это позволяет кристаллическому фиолетовому красителю уйти. Только обесцвеченные клетки поглощают розовый краситель сафранин, что объясняет разницу в цвете между двумя типами клеток. По завершении процедуры окрашивания по Граму грамположительные клетки становятся фиолетовыми, а грамотрицательные — розовыми.

При интерпретации окрашенного по Граму мазка необходимо также описать морфологию (форму) клеток и их расположение. На рисунке 5 представлены два различных типа бактерий, которые можно различить по реакции окрашивания по Граму, а также по их форме и расположению.Ниже опишите эти характеристики для обеих бактерий:

Грамположительные бактерии: Грамотрицательная бактерия:
Морфология
Расположение

Кислотостойкий краситель

Некоторые бактерии производят восковидное вещество миколиков кислоту , когда они строят свои клеточные стенки.Миколевая кислота действует как барьер, защищая клетки от обезвоживания, а также от фагоцитоза клетками иммунной системы хозяина. Этот восковой барьер также предотвращает проникновение красителей в клетку, поэтому окрашивание по Граму не работает с микобактериями, такими как Mycobacterium , которые являются патогенами человека и животных. Для этих бактерий используется метод кислотного быстрого окрашивания .

Рисунок 6. Кислотоустойчивые палочки в мокроте

Для выполнения кислотостойкой окраски термофиксированный мазок заливают первичным красителем карбол-фуксин, а предметное стекло нагревают на водяной бане с водяным паром.Тепло «плавит» восковую клеточную стенку и позволяет клеткам поглощать краситель. Затем предметному стеклу дают остыть и добавляют раствор кислоты и спирта в качестве обесцвечивателя. Клетки, которые являются «кислотостойкими» из-за миколовой кислоты в их клеточной стенке, сопротивляются обесцвечиванию и сохраняют первичное окрашивание. Все остальные типы клеток будут обесцвечены. Затем в качестве контрастного красителя используется метиленовый синий. В конце концов, кислотоустойчивые бактерии (КУБ) будут окрашены в ярко-розовый цвет, а все остальные типы клеток будут казаться голубыми.

Методы окрашивания для выделения специфических клеточных структур

Капсула : Полисахаридная слизь, которая окружает некоторые виды бактерий и несколько типов эукариотических микробов, лучше всего визуализируется при отрицательном окрашивании клеток. В этом методе бактерии сначала смешивают с красителем, а затем каплю смеси распределяют по поверхности предметного стекла тонкой пленкой. При использовании этого метода капсулы выглядят как прозрачный слой вокруг бактериальных клеток с темным фоном.

MetaChromatic гранул или или Другие INTRACTOMETOPLAMSIC Органы : Некоторые бактерии могут содержать тела хранения, которые могут быть окрашены. Одним из примеров является грамположительная бацилла Corynebacterium , которая хранит фосфат в структурах, называемых «волютин» или метахроматических гранулах, которые находятся внутри клеточной мембраны. Различные методы окрашивания используются для визуализации внутрицитоплазматических телец у бактерий, которые часто дают ключ к идентификации при наблюдении в клетках.

Окрашивание эндоспор

Эндоспоры — это спящие формы живых бактерий, и их не следует путать с репродуктивными спорами, вырабатываемыми грибами. Эти структуры производятся несколькими родами грамположительных бактерий, почти всеми бациллами, в ответ на неблагоприятные условия окружающей среды. Двумя распространенными бактериями, которые производят эндоспоры, являются Bacillus или Clostridum . Оба живут в основном в почве и как симбионты растений и животных и производят эндоспоры, чтобы выжить в среде, которая быстро и часто меняется.

Процесс эндоспоруляции (образование эндоспор) включает несколько стадий. После того, как бактериальная клетка реплицирует свою ДНК, образуются слои пептидогликана и белка, окружающие генетический материал. После полного формирования эндоспора высвобождается из клетки и может находиться в состоянии покоя в течение нескольких дней, недель или лет. Когда преобладают более благоприятные условия окружающей среды, эндоспоры прорастают и возвращаются к активной деятельности в качестве вегетативных клеток.

Зрелые эндоспоры обладают высокой устойчивостью к условиям окружающей среды, таким как тепло и химические вещества, что позволяет бактериям выживать в течение очень длительного периода времени.Эндоспоры, образовавшиеся миллионы лет назад, были успешно возвращены к жизни, просто обеспечив их водой и пищей.

Поскольку оболочка эндоспор очень устойчива к окрашиванию, был разработан специальный метод, чтобы их было легче увидеть в светлопольном микроскопе. Этот метод, называемый окрашиванием эндоспор , использует либо тепло, либо длительное время воздействия, чтобы побудить эндоспоры принять первичное окрашивание, обычно водорастворимый краситель, такой как малахитовый зеленый, поскольку эндоспоры проницаемы для воды.После этапа обесцвечивания, при котором краситель удаляется из вегетативных клеток в мазке, применяется контрастное окрашивание сафранином для придания цвета и контраста. При окрашивании этим методом эндоспоры становятся зелеными, а вегетативные клетки окрашиваются в розовый цвет, как показано на рисунке 7.

Рисунок 7. Бактериальные клетки с эндоспорами, окрашенные красителем для эндоспор. Рисунок 8. Бациллы с эндоспорами при фазово-контрастной микроскопии.

Хотя сами эндоспоры устойчивы к окрашиванию по Граму, бактериальные клетки, захваченные в процессе создания этих структур, могут быть окрашены.В этом случае эндоспоры видны как четкие овальные или сферические участки внутри окрашенной клетки. Эндоспоры также можно непосредственно наблюдать в клетках с помощью фазово-контрастной микроскопии, как показано на рисунке 8.

Поскольку многие методы дифференциального окрашивания требуют нескольких этапов и занимают много времени, мы не будем использовать все описанные выше методы дифференциального окрашивания.

Предварительно окрашенные предметные стекла

будут использоваться для визуализации бактериальных капсул, метахроматических гранул и кислотоустойчивых бацилл.Получите по одному предметному стеклу каждой из трех бактерий, перечисленных в таблице ниже. Просматривая эти слайды, обратите внимание на «выделенные» структуры. Ваш изолят из окружающей среды может иметь одну или несколько из этих клеточных особенностей, и научиться их распознавать поможет в идентификации. Все это следует рассматривать с помощью масляного иммерсионного объектива.

Бактерия Пятно Описание или эскиз ячеек с указанным признаком
Flavobacterium capsulatum Краситель для капсул
Corynebacterium diphtheriae Метиленовый синий (метахроматические гранулы)
Микобактерии туберкулеза Кислотостойкий краситель

Краситель по Граму

Все процедуры окрашивания следует проводить над раковиной.Будет продемонстрирована процедура окрашивания по Граму, а обзор представлен в таблице 1.

Таблица 1. Этапы процедуры окрашивания по Граму.
Ступенька Процедура Результат
Первичный краситель (кристаллический фиолетовый) Добавьте к мазку несколько капель кристаллического фиолетового и оставьте на 1 минуту. Промойте слайд водой. Как грамположительные, так и грамотрицательные клетки окрашиваются кристаллическим фиолетовым в фиолетовый цвет.
Морилка (йод) Добавьте в мазок несколько капель йода и оставьте на 1 минуту. Промойте слайд водой. Йод «задает» кристаллический фиолетовый цвет, поэтому оба вида бактерий останутся фиолетовыми.
Обесцвечивание (этанол) Добавляйте капли этанола по одной по по раз по , пока сток не станет прозрачным.Промойте слайд водой. Грамположительные клетки устойчивы к обесцвечиванию и остаются фиолетовыми. Краситель высвобождается из грамотрицательных клеток.
Контрастное окрашивание (сафранин) Добавьте в мазок несколько капель сафранина и оставьте на одну минуту. Промойте предметное стекло водой и промокните насухо. Грамотрицательные клетки окрашиваются сафранином в розовый цвет. Этот краситель не действует на грамположительные клетки, которые остаются пурпурными.

Доброволец с вашего лабораторного стола должен получить культуры бактерий, которые вы будете использовать в этой лаборатории, в соответствии с указаниями вашего инструктора.Одна из культур будет грамположительной бактерией, а другая – грамотрицательной. Ниже напишите названия бактерий, которые вы будете использовать, вместе с BSL для каждой культуры:

________________________________________________________________________________________________

Возьмите два предметных стекла и приготовьте мазок каждой из двух бактериальных культур, по одной на предметное стекло, как показано на рисунке. Дать ПОЛНОСТЬЮ высохнуть на воздухе и зафиксировать теплом. Оба мазка окрасить по Граму.Рассмотрите слайды с помощью светового микроскопа с увеличением в 1000 раз и запишите свои наблюдения в таблицу ниже.

Название культуры Реакция окрашивания по Граму Клеточная морфология Расположение

Окраска по Граму «Окончательный осмотр»: приготовьте мазок, содержащий смесь грамположительных и грамотрицательных бактерий, добавив небольшое количество каждой бактерии в одну каплю воды на предметном стекле.Нагревание фиксирует мазок и окрашивает его по Граму. Вы должны быть в состоянии определить реакцию окрашивания по Граму, клеточную морфологию и расположение ОБЕИХ бактерий в этом смешанном мазке. Ваш преподаватель может попросить показать этот слайд и предложить конструктивный комментарий.

Окрашивание эндоспор

Лишь несколько родов бактерий продуцируют эндоспоры, и почти все они являются грамположительными бациллами. Наиболее примечательны виды Bacillus и Clostridium , которые естественным образом обитают в почве и являются обычными загрязнителями поверхностей.Рост Clostridium spp. обычно ограничивается анаэробной средой; Bacillus spp. могут расти аэробно и анаэробно. Эндоспорообразующие бактерии отличаются от других групп грамположительных бацилл и отличаются своими эндоспорами.

Обзор процедуры окрашивания эндоспор представлен в таблице 2.

Таблица 2. Этапы процедуры окрашивания эндоспор.
Ступенька Процедура Результат
Первичный краситель (малахитовый зеленый) Добавьте в мазок несколько капель малахитового зеленого и оставьте на 10 минут.Если пятно начинает подсыхать, добавьте дополнительные капли. Вегетативные клетки немедленно вступают в реакцию с первичным красителем. Эндоспоры устойчивы к окрашиванию, но в конечном итоге поглощают краситель.
Обесцвечивание (вода) Промойте предметное стекло под слабой струей воды в течение 10-15 секунд. После окрашивания эндоспоры остаются зелеными. Тщательное ополаскивание водой обесцвечивает вегетативные клетки.
Контрастное окрашивание (сафранин) Добавьте в мазок несколько капель сафранина и оставьте на 1 минуту.Промойте предметное стекло и промокните насухо. Обесцвеченные вегетативные клетки окрашиваются в контрастный цвет и становятся розовыми; эндоспоры светло-зеленые.

После окрашивания эндоспоры обычно выглядят как светло-зеленые овальные или сферические структуры, которые можно увидеть внутри или снаружи вегетативных клеток, которые кажутся розовыми.

Форма и расположение эндоспор внутри бактериальных клеток, а также то, расширяются ли спорангии (D) или не расширяются (ND) стороны клетки, являются важными характеристиками, которые помогают различать виды (см. Рисунок 9). .

Рисунок 9
  1. Овальный, центральный, не расширенный (ND)
  2. Овальный, терминальный, ND (и параспоральный кристалл)
  3. Овальный, концевой, расширенный (D)
  4. Овальный, центральный, D
  5. Сферический, концевой, D
  6. Овальный, боковой, D

Эндоспоры достаточно устойчивы к большинству процедур окрашивания; однако в обычно окрашенном мазке они могут быть видны как «очертания» с чистым пространством внутри. Если вы наблюдаете «очертания» или то, что кажется «призраками» клеток в окрашенном по Граму мазке грамположительных бацилл, то следует также провести окрашивание эндоспор, чтобы подтвердить наличие или отсутствие эндоспор.

Доброволец с вашего лабораторного стола должен получить бактериальные культуры для окрашивания эндоспор в соответствии с указаниями вашего инструктора. Обратите внимание, что все они будут видами Bacillus . Подготовить мазки и окрасить каждый, используя технику окрашивания эндоспор. Рассмотрите слайды и отметьте форму и расположение эндоспоры, а также внешний вид спорангиев (набухшие или не набухшие) в таблице ниже:

Название культуры Форма эндоспор Местоположение Спорангий

Кроме того, выберите ОДНУ из указанных выше культур и окрасьте ее по Граму.Запишите свои результаты ниже в отведенных местах:

Наименование культуры, окрашенной по Граму: _________________________________________________________

Реакция окрашивания по Граму и клеточная морфология: ___________________________________________

Видны ли эндоспоры в мазке, окрашенном по Граму? _________________ Если вы видите эндоспоры, опишите, как они выглядят в препарате, окрашенном по Граму, и чем они похожи и отличаются от того, что вы видите в препарате, окрашенном эндоспорами.

 

CDC – DPDx – Процедуры диагностики

Окрашивание мазков крови

Окрашивайте только один набор мазков и оставьте дубликаты неокрашенными. Последнее пригодится, если возникнут проблемы во время окрашивания и/или если вы захотите позже отправить мазки в референс-лабораторию.

Краситель Райта (Райт-Гимза)

Этот краситель, используемый в гематологии, не оптимален для кровепаразитов. Его можно использовать, если необходимы быстрые результаты, но его следует по возможности дополнить подтверждающей окраской по Гимзе, чтобы можно было продемонстрировать точки Шюффнера.

Краситель Гимзы

Рекомендуется для обнаружения и идентификации паразитов крови.

  1. Стандартный буфер Гимзы 100 × — 0,67 М
    Na2HPO4 59,24 г
    Нах3ПО4х3О 36,38 г
    Вода деионизированная 1000,00 мл

    Автоклавирование или стерилизация на фильтре (поры 0,2 мкм). Стерильный буфер стабилен при комнатной температуре в течение одного года.

  2. Рабочий буфер Гимзы – 0,0067 М, рН 7,2
    Буферный раствор Гимзы 10,0 мл
    Вода деионизированная 990,0 мл

    Перед использованием проверьте pH. Должно быть 7.2. Стабилен при комнатной температуре в течение одного месяца.

  3. . Тритон Х-100 5%
    Вода деионизированная (нагретая до 56°C) 95,0 мл
    Тритон Х-100 5.0 мл

    Предварительно нагрейте деионизированную воду и медленно добавляйте Triton X-100, перемешивая.

  4. Стандартный краситель по Гимзе (краситель по Гимзе доступен в продаже, но следующий состав дает более стабильные результаты и не имеет срока годности)
    Стеклянные бусины, 3,0 мм 30,0 мл
    Абсолютный метанол, без ацетона 270,0 мл
    Порошок для окрашивания по Гимзе (сертифицированный) 3.0 г
    Глицерин 140,0 мл
    1. Поместите в коричневую бутылку объемом 500 мл стеклянные шарики и другие ингредиенты в указанном порядке. Плотно завинтить крышку. Используйте чистую и сухую стеклянную посуду.
    2. Поместите бутылки под углом на шейкер; встряхивать умеренно от 30 до 60 минут ежедневно, по крайней мере 14 дней.
    3. При хранении плотно закупоренным и обезвоженным краситель Гимза остается стабильным при комнатной температуре в течение неопределенного времени (со временем окрашивание улучшается).
    4. Непосредственно перед использованием встряхните флакон. Отфильтруйте небольшое количество этого маточного красителя через фильтровальную бумагу Whatman #1 в пробирку. Пипеткой из этой пробирки приготовить рабочее окрашивание по Гимзе.
  5. Рабочий краситель Гимза (2,5%): делают свежими для каждой партии мазков.
    Рабочий буфер Гимзы 39 мл
    Краситель Гимзы 1 мл
    5% Тритон Х-100 2 капли
Окрашивание
  1. Приготовьте свежий рабочий краситель Гимза в банке для окрашивания в соответствии с приведенными выше инструкциями.(40 мл адекватно заполняют стоячую банку Coplin; для банок другого размера адаптируйте объем, но не меняйте пропорции).
  2. Налейте 40 мл рабочего буфера Гимзы во вторую банку для окрашивания. Добавьте 2 капли Triton X-100. Адаптируйте объем к размеру банки.
  3. Поместите предметные стекла в рабочий краситель Гимза (2,5%) на 45–60 минут.
  4. Удалите тонкие предметные стекла и промойте их 3-4 раза погружением в буфер Гимзы. Толстые мазки следует оставить в буфере на 5 минут.
  5. Высушите предметные стекла в вертикальном положении на стойке.

Примечание: В отличие от этих 45-60 минут в 2,5% красителе по Гимзе мазки можно окрашивать в течение более короткого времени в более концентрированных красителях. Одна альтернатива составляет 10 минут в 10% Гимза; более короткие пятна дают более быстрые результаты, но используют больше красителей и могут иметь менее предсказуемое качество.

Процедура окрашивания: Контроль качества

Чтобы гарантировать получение надлежащих результатов окрашивания, положительный мазок (малярия) должен быть включен в каждую новую партию рабочего красителя Гимзы.Поскольку мазки для контроля качества не доступны в продаже, их можно приготовить из крови пациента и хранить для будущего использования следующим образом:

  1. Выберите образец крови пациента, антикоагулированный ЭДТА, в котором содержится достаточное количество паразитов, чтобы по крайней мере один паразит был обнаружен в каждых 2–3 полях.
  2. Сделайте как можно больше тонких мазков, желательно в течение часа после забора крови у пациента.
  3. Дайте мазкам быстро высохнуть с помощью вентилятора или воздуходувки при комнатной температуре.
  4. Фиксация мазков в абсолютном (100%) метаноле; дайте им высохнуть.
  5. Поместите их лицевой стороной к задней части в коробку, не разделяя пазов.
  6. Наклейте снаружи коробки этикетку с названием вида, датой и «Контрольными предметными стеклами Гимзы».
  7. Хранить при температуре -70°C (или ниже), если целью является изготовление предметных стекол для контроля качества.
  8. Непосредственно перед использованием выньте мазок из коробки и дайте испариться конденсату; пометьте слайд «+ малярия» и поставьте текущую дату.Теперь мазок готов к окрашиванию, поскольку ранее он был зафиксирован.

Что такое гистология: Руководство по гистологии

Гистологические красители, отличные от H&E

Основные красители
Метиловый зеленый Зеленый
Метиленовый синий Синий
Пиронин Г Красный
Толуидиновый синий Синий
Кислотные красители
Фушин кислый Красный
Анилиновый синий Синий
Эозин Красный
Оранжевый G Оранжевый

Кислотные и основные красители

В этой таблице приведены некоторые примеры основных и кислотных красителей, используемых при окрашивании.

Для основных красителей реакция анионных групп клеток (к ним относятся фосфатные группы нуклеиновых кислот, сульфатные группы гликозоаминогликанов и карбоксильные группы белков) зависит от рН, при котором они используются.

Для кислых красителей рассматриваемый краситель часто может дополнительно быть селективным в отношении определенных ацидофильных компонентов. т.е. в методе, называемом методом окрашивания Мэллори, используются три кислых красителя: анилиновый синий, кислый фускин и оранжевый G, которые избирательно окрашивают коллаген, цитоплазму и эритроциты соответственно.

Периодическая кислотная реакция Шиффа (PAS)

Реактив Шиффа представляет собой отбеленный основной фускин, реагирующий с альдегидными группами. Эта реакция приводит к окрашиванию среза в темно-красный цвет. Это основа окрашивания PAS.

PAS окрашивает углеводы и макромолекулы, богатые углеводами, в темно-красный цвет (пурпурный).

Таким образом,

ПАС окрашивает:
гликоген внутриклеточную форму хранения углеводов в клетках
Слизь в клетках и тканях, базальные мембраны и Щеточные края канальцев почек и тонкого и толстого кишечника Ретикулярные волокна (т.е. коллаген) в соединительной ткани и хрящах.

В приведенном выше примере муцин, продуцируемый бокаловидными клетками, окрашивается этим красителем в пурпурный цвет.

Трихром Массона.

Часто используется для окрашивания соединительной ткани. Трихром – означает, что техника дает три цвета. Ядра и другие базофильные (базоподобные) структуры окрашиваются в синий цвет, цитоплазма, мышцы, эритроциты и кератин — в ярко-красный цвет. Коллаген окрашивается в зеленый или синий цвет, в зависимости от того, какой вариант методики используется.

Синий альциан

Альциановый синий — это муциновый краситель, который окрашивает определенные типы муцинового синего. Хрящ также окрашивается в синий цвет. Его можно использовать с красителями H&E и с красителями Ван Гизона.

Ван Гизон

Окрашивает коллаген в красный цвет, ядра в синий, а эритроциты и цитоплазму в желтый. Его можно комбинировать с окрашиванием эластина, которое окрашивает эластин в синий/черный цвет. Его часто используют для сосудов и кожи.

Краситель ретикулиновый

Окрашивает ретикулиновые волокна в синий/черный цвет.Используется с H&E

Азан

Ядра окрашены в ярко-красный цвет, коллаген, базальная мембрана и муцин окрашены в синий цвет, мышцы и эритроциты окрашены в цвет от оранжевого до красного. Хорошо окрашивает соединительную ткань и эпителий.

Гимза.

Обычно используется для окрашивания крови и мазков костного мозга. Ядра окрашены от темно-синего до фиолетового, цитоплазма бледно-голубая, эритроциты бледно-розовые.

Толуидиновый синий.

Основной краситель, окрашивающий кислотные компоненты в различные оттенки синего.Обычно используется для тонких акриловых или эпоксидных секций.

Серебряный и золотой методы.

Иногда используется для демонстрации тонких структур, таких как клеточные отростки в нейронах. Образует черное, коричневое или золотистое пятно.

Хромовые квасцы/гемотоксилин.

Редко используется – окрашивает ядра в синий цвет, а цитоплазму – в красный. Для поджелудочной железы клетки, секретирующие глюкагон, окрашены в розовый цвет, а клетки, секретирующие инсулин, окрашены в синий цвет.

Исамин синий/эозин

То же, что H&E, но синий цвет более интенсивный.

Ниссля и метиленовый синий

Основной краситель, используемый для окрашивания грубых ER в нейронах.

Судан Черный и осмий.

Эти красители окрашивают липидсодержащие структуры, такие как миелин, в коричневато-черный цвет.

Иммуногистохимические методы.

Это особый тип окрашивания, при котором используются первичные антитела, которые специфически метят белок, а затем флуоресцентно меченные вторичные антитела используются для связывания с первичным антителом, чтобы показать, где связалось первое (первичное) антитело.Световой микроскоп, оснащенный флуоресценцией, используется для визуализации окрашивания. Флуоресцентные антитела возбуждаются при одной длине волны света, а затем испускают свет при другой длине волны. Используя правильную комбинацию фильтров, можно наблюдать картину окрашивания, создаваемую испускаемым флуоресцентным светом. Например, на этой фотографии показаны некоторые клетки, которые были иммунофлуоресцентно окрашены на белок актин.

Окрашивание по Граму

— StatPearls — NCBI Bookshelf

Введение

Окрашивание по Граму — один из наиболее важных методов окрашивания в микробиологии.Он получил свое название от датского бактериолога Ганса Кристиана Грама, который впервые представил его в 1882 году, в основном для выявления организмов, вызывающих пневмонию. Часто первый выполняемый тест, окрашивание по Граму, включает использование кристаллического фиолетового или метиленового синего в качестве основного цвета. Термином для организмов, которые сохраняют основной цвет и кажутся пурпурно-коричневыми под микроскопом, являются грамположительные организмы. Микроорганизмы, которые не поддаются первичной окраске, кажутся красными под микроскопом и являются грамотрицательными микроорганизмами.

 Первым этапом окрашивания по Граму является использование красителя кристаллический фиолетовый для первоначального окрашивания предметного стекла. Следующий шаг, также известный как фиксация красителя, включает использование йода для образования комплекса кристаллический фиолетовый-йод, чтобы предотвратить легкое удаление красителя. Впоследствии для удаления красителя используется обесцвечиватель, часто растворитель этанола и ацетона. Основной принцип окрашивания по Граму заключается в способности стенки бактериальной клетки удерживать краситель кристаллический фиолетовый во время обработки растворителем.[3] Грамположительные микроорганизмы имеют более высокое содержание пептидогликана, тогда как грамотрицательные микроорганизмы имеют более высокое содержание липидов.[4] 

Изначально все бактерии поглощают краситель кристаллический фиолетовый; однако при использовании растворителя липидный слой грамотрицательных организмов растворяется. При растворении липидного слоя грамотрицательные теряют первичную окраску. Напротив, растворитель обезвоживает стенки грамположительных клеток с закрытием пор, предотвращая диффузию комплекса фиолетового с йодом, и, таким образом, бактерии остаются окрашенными. Продолжительность обесцвечивания является критическим этапом окрашивания по Граму, поскольку длительное воздействие обесцвечивающего агента может удалить все пятна от обоих типов бактерий.[6]

Последним этапом окрашивания по Граму является использование основного окрашивания фуксином для придания обесцвеченным грамотрицательным бактериям розового цвета для облегчения идентификации. Он также известен как контрастное окрашивание. Некоторые лаборатории используют сафранин в качестве контрастного красителя; однако основной фуксин окрашивает грамотрицательные микроорганизмы более интенсивно, чем сафранин. Точно так же Hemophilus spp., Legionella app и некоторые анаэробные бактерии плохо окрашиваются сафранином.

Сбор образцов

Для окрашивания по Граму можно использовать различные клинические образцы.Некоторыми из обычно используемых образцов являются мокрота, кровь, спинномозговая жидкость, асцитическая жидкость, синовиальная жидкость, плевральная жидкость, моча и т. д. Также можно использовать мазки из ноздрей, горла, прямой кишки, раны, шейки матки и т. д. Сбор образцов всегда должен осуществляться в стерильных контейнерах.

Процедуры

Типы оборудования, необходимого для окрашивания по Граму, включают:

 Реагенты, необходимые для окрашивания по Граму, включают:

  • Кристаллический фиолетовый (основной краситель) [1]
  • Раствор йода по Граму (протрава) [1]
  • Ацетон/этанол (50:50 об.:об.) (обесцвечиватель) [1]
  • 0.1 % основной раствор фуксина (контрастное окрашивание) [1]
  • Вода

Процедура

1. Приготовление мазка:

  • Петля для посева используется для переноса капли взвешенной культуры на предметное стекло микроскопа.

  • Если в чашке Петри или в наклонной культуральной пробирке есть колония, добавляется капля или несколько петлей воды, чтобы облегчить перенос минимального количества колонии на предметное стекло.

  • Требуется минимальное количество культуры. Если культуру можно обнаружить визуально на инокуляционной петле, это указывает на сбор слишком большого количества культуры.

  • Культуру наносят прививочной петлей до получения ровной тонкой пленки по кругу диаметром 15 мм. Типичное предметное стекло может содержать до 4 небольших мазков при исследовании более чем одной культуры.

  • Предметное стекло можно сушить на воздухе или с помощью нагревания над нежным пламенем.Предметное стекло следует перемещать по кругу над пламенем, чтобы предотвратить перегрев или образование кольцевых узоров на предметном стекле. Тепло способствует адгезии клеток к предметному стеклу и предотвращает значительную потерю культуры во время промывания.

2. Окраска по Граму:

  • Краситель кристаллический фиолетовый добавляется поверх фиксированной культуры.

  • Через 10–60 секунд краситель смывается, а излишки красителя смываются водой. Цель состоит в том, чтобы смыть пятно без потери фиксированной культуры.

  • Раствор йода покрывает мазок на 10–60 секунд. Этот шаг известен как «фиксация красителя». Раствор йода сливают, предметное стекло промывают проточной водой. Избыток воды с поверхности стряхивается.[7]
  • На предметное стекло добавлено несколько капель обесцвечивающего средства. Обесцвечиватели часто представляют собой смешанный растворитель этанола и ацетона. Этот этап известен как «обработка растворителем». Предметное стекло промывают водой в течение 5 секунд. Чтобы предотвратить чрезмерное обесцвечивание грамположительных клеток, прекратите добавлять обесцвечивающий агент, как только растворитель перестанет окрашиваться при протекании по предметному стеклу.

  • Мазок докрашивают основным раствором фуксина в течение 40–60 секунд. Раствор фуксина смывают водой, а избыток воды промокают салфеткой. Слайд также можно высушить на воздухе после стряхивания лишней воды.

3. Микроскопия предметного стекла:

  • Предметное стекло следует исследовать под микроскопом в иммерсионном масле.

  • При первоначальном исследовании слайдов следует использовать объектив X40 для оценки распределения мазка, а затем их следует исследовать с помощью масляного иммерсионного объектива X100.

  • Все участки предметного стекла требуют первоначального осмотра. Области толщиной всего в одну клетку должны быть исследованы. Толстые области на слайдах часто дают переменные и неправильные результаты.

  • Лейкоциты и макрофаги окрашиваются грамотрицательно.

  • Клетки плоского эпителия окрашиваются грамположительно.

Используются различные модификации окрашивания по Граму, такие как окрашивание по Граму Аткина, окрашивание по Граму Берка и т. д.[8]

Возможный диагноз

Окрашивание по Граму помогает в диагностике заболевания или патологического состояния.

Примеры грамположительных микроорганизмов:

    • Cocci:

    • COCCI:

    • Видов Staphylococcus и Стрептококк

      0 Виды

    • Bacilli: Виды Corynebacterium , CLASTTRIDIUM Вид

    • Виды

    • Примеры грамотрицательных организмов [9] :
    • COCCI:

    • Mocci: Neisseria Gonorheae, Neisseria Meningitidis, и Moringella

      0 Вид

    • Bacilli: Escherichia катушка, псевдомонас видов, Proteus вид

    • примеры грамма вариабельные микроорганизмы включают:

    • Actinomyces видов

    Нормальные и критические результаты

    Нормальным результатом в стерильной жидкости организма должно быть отсутствие каких-либо патологических организмов в мазке.Организмы идентифицируются по цвету и форме. Грамположительные микроорганизмы имеют пурпурную или синюю окраску, а грамотрицательные — розовую или красную. Бациллы имеют палочковидную форму, а кокки – сферическую.

    Выводы при окрашивании по Граму, указывающие на лежащую в основе бактериальную инфекцию:

    • Грамположительные кокки в скоплениях: обычно характерны для видов Staphylococcus , таких как S. aureus.

    • Грамположительные кокки в цепочках: обычно характерны для видов Streptococcus , таких как S.pneumoniae, стрептококки группы В

    • Грамположительные кокки в тетрадах: обычно характерны для Micrococcus spp.

    • Грамположительные палочки, густые: обычно характерны для Clostridium spp., например C. perfringes , C. septicum .

    • Грамположительные палочки, тонкие: обычно характерны для Listeria spp.

    • Грамположительные палочки разветвленные: обычно характерны для Actinomyces и Nocardia .

    • Грамотрицательные диплококки: Обычно характерны для Neisseria spp., например N. meningitidis .

(обратите внимание: MORAXELLA SPP. И Acinetobacter SPP., Часто бывают диплококкальными в морфологии. Ацинетобактер может иногда появляться как грамположительные кокки, и они могут быть плеоморфными.

9
  • Coccobacilli : обычно характерны для Acinetobacter spp., и они могут быть грамположительными, грамотрицательными или грамвариабельными.

  • Грамотрицательные палочки, тонкие: обычно характерны для Enterobacteriaceae , например E. coli .

  • Коккобациллы: обычно характерны для видов Hemophilus , таких как H. influenzae .

  • Изогнутый: обычно характерен для Vibrio spp.,; Campylobacter spp., такие как V. cholerae и C. jejuni .

  • Форма тонкой иглы: обычно характерна для Fusobacterium spp.

Грамвариабельные организмы: эти организмы не группируются ни в грамположительные, ни в грамотрицательные организмы.

Мешающие факторы

Если образец нестерильный, образец может быть контаминирован несколькими микроорганизмами. Точно так же неправильный сбор образцов и предшествующее использование антибиотиков могут помешать росту микроорганизмов. При интерпретации окраски по Граму, как описано Всемирной организацией здравоохранения в 2003 г., необходимо выполнить следующие шаги:

1.Общий характер мазка требует анализа при малом увеличении (10X)

  • Фон предметного стекла, как правило, должен быть грамотрицательным или прозрачным bacillus бактерии

  • Мазок должен быть толщиной в одну клетку без перекрытия клеток

2.Следует использовать малое увеличение, чтобы отметить следующее:

  • Относительное количество полиморфноядерных нейтрофилов (PMNs), мононуклеарных клеток и эритроцитов (RBCs)

3. Иммерсионное обследование нескольких месторождений необходимо учитывать следующее:

  • Микроорганизмы: если идентифицированы, укажите количество и морфологию и уплощенная

  • Внешний вид сторон: параллельный, яйцевидный, неправильный или вогнутый

  • Ось организма: прямая, изогнутая или спиральная

  • Плеоморфизм (изменчивость формы) 9004

    4 расширения

Осложнения

Интерпретация препаратов может быть затруднена, если микроскопический мазок густой и слипшийся.Время обесцвечивания следует очень тщательно контролировать, чтобы избежать недостаточного или чрезмерного обесцвечивания. Более толстые мазки требуют более длительного времени обесцвечивания. Точно так же культуры должны подвергаться оценке, пока они еще свежие. Старые культуры, как правило, теряют пептидогликановые клеточные стенки, что предрасполагает грамположительные клетки к грамотрицательным или грамвариабельным. Окрашивание по Граму бесполезно для организмов без клеточной стенки, таких как виды Mycoplasma , и для более мелких бактерий, таких как виды Chlamydia и Rickettsia .

Окрашивание по Граму не может ложно выявить микроорганизмы в следующем сценарии:

    • Использование антибиотиков до сбора образца

    • Неуместной возраст культуры: слишком молодые или слишком старые

    • , фиксируя мазок до его сухого

    • Мазок слишком толстый

    • низкая концентрация Из хрусталя Violet

    • Недостаточное воздействие йода

    • Отсутствие опыта в подготовке слайда, и просмотр слайда

    Иногда результаты окрашивания по Граму могут не совпадать с окончательными результатами посева и потенциально могут привести к ненадлежащему использованию антибиотиков.[10]

    Клиническое значение

    Окрашивание по Граму часто является начальным диагностическим тестом для оценки инфекций. Использование окраски по Граму облегчает быстрое применение соответствующих антибиотиков. Однако генетические последовательности и молекулярные методы более специфичны, чем классическое окрашивание по Граму.

    Ссылки

    1.
    БАРТОЛОМЬЮ Дж. В., МИТТВЕР Т. Окрашивание по Граму. Bacteriol Rev. 1952 Mar; 16(1):1-29. [Бесплатная статья PMC: PMC180726] [PubMed: 14925025]
    2.
    О’Тул, Джорджия. Классический обзор: как работает окраска по Граму. J Бактериол. 2016 01 декабря;198(23):3128. [Бесплатная статья PMC: PMC5105892] [PubMed: 27815540]
    3.
    LIBENSON L, McILROY AP. О механизме окрашивания по Граму. J заразить Dis. 1955 г., июль-август; 97 (1): 22–6. [PubMed: 13242849]
    4.
    ШУГАР Д., БАРАНОВСКАЯ Дж. Исследования по окрашиванию по Граму; Значение белков в реакции Грама. Acta Microbiol Pol (1952). 1954;3(1):11-20. [PubMed: 13147751]
    5.
    ХАСЛЕТТ КАК. Химическое значение теста Грама для бактерий. Aust J Sci. 1947 21 июня; 9 (6): 211. [PubMed: 20255991]
    6.
    Попеску А., Дойл Р.Дж. Окраска по Граму спустя более века. Биотехнологический гистохим. 1996 г., май; 71 (3): 145–51. [PubMed: 8724440]
    7.
    MITTWER T, BARTHOLOMEW JW, KALLMAN BJ. Механизм реакции Грама. II. Функция йода в окраске по Граму. Технология окрашивания. 1950 окт; 25 (4): 169-79. [PubMed: 14782050]
    8.
    Уилсон М.Л. Клинически значимая, рентабельная клиническая микробиология. Стратегии сокращения ненужного тестирования. Ам Джей Клин Патол. 1997 г., февраль; 107 (2): 154–67. [PubMed:

    64]
    9.
    Беверидж Т.Дж., Дэвис Дж.А. Клеточные реакции Bacillus subtilis и Escherichia coli на окраску по Граму. J Бактериол. 1983 г., ноябрь; 156 (2): 846-58. [Статья бесплатно PMC: PMC217903] [PubMed: 6195148]
    10.
    Rand KH, Tillan M. Ошибки в интерпретации окрашивания по Граму из положительных культур крови.Ам Джей Клин Патол. 2006 ноябрь; 126 (5): 686-90. [PubMed: 17050065]

    Как 6 разных пятен выглядят на 5 популярных породах дерева

    Этот пост спонсируется Minwax.

    В течение многих лет мы хотели провести исследование древесины и морилки, и в моей голове я хотел сделать для каждого из типов древесины с примерно 20 различными морилками для каждой. Но из-за ограниченных ресурсов (не говоря уже о пространстве) мы остановились на 5 популярных породах дерева, обычно используемых мастерами-любителями, с 6 различными оттенками; 2 светлых, 2 средних и 2 темных.

    Типы древесины, которые мы выбрали, также сильно различаются: от чрезвычайно мягкой (береза) до твердой (красный дуб) с оттенками по всей карте. Твердость влияет не только на то, как древесина будет впитывать пятна (более твердая древесина лучше и равномернее впитывает пятна), но и на естественный цвет древесины.

    Всегда популярная и недорогая сосна имеет желтый оттенок.
    Береза ​​имеет розовый оттенок.
    Тополь имеет зеленый оттенок.
    Дуб Белый имеет самый нейтральный оттенок.
    Держу пари, ты никогда не угадаешь оттенки Красного Дуба. (Подсказка: красный)

    Чтобы дать каждой древесине наилучшие шансы на окрашивание, мы начали наше исследование с кондиционера Minwax для предварительной окраски древесины. Обработка необработанной древесины кондиционером помогает предотвратить появление полос и пятен, выравнивая впитывание пятен на масляной основе. Может наноситься на любую древесину , но особенно необходим при работе с мягкой или пористой древесиной, такой как сосна, ольха, береза ​​и клен. Через минуту вы увидите, насколько это необходимо, потому что , конечно, , мы продвинулись в своих наблюдениях еще на шаг вперед и использовали кондиционер только на нижней половине каждого куска дерева, чтобы вы могли увидеть разницу, которую он имеет.

    Мы дали кондиционеру впитаться в течение 15 минут, а затем стерли все излишки, сняли ленту и приступили к нанесению 6 различных красителей на все пять наших типов древесины.

    Напоминаем, что здесь представлены все виды древесины в их естественном необработанном виде:

    1. Минвакс Маринованный дуб. № Эта морилка почти не добавляла цвета любой из досок (может быть, немного светлее с оттенком зеленого), но действительно подчеркивала их естественный цвет и текстуру.Все типы древесины хорошо переносили морилку, за исключением некондиционированной стороны из березы.

    2. Minwax Simply White. Minwax недавно выпустил морилку Simply White, и я в восторге от нее! Это действительно смягчило тон и цвет каждого дерева, не маскируя зернистость, как это делают полупрозрачные пятна. Вы можете ясно видеть цветовые оттенки дерева (желтый, розовый, зеленый, нейтральный, красный), но они не так ярко выражены. Оба вида дуба приобрели вид Cerused, который мне очень нравится.Зеленый цвет, который обычно очень ярко выражен в тополе, стал более теплым серым. Некондиционированная сторона из березы снова боролась с пятном, но вы также можете видеть, что кондиционированная сторона каждой доски немного темнее.

    3. Minwax Golden Pecan. Мы решили поэкспериментировать с этим цветом морилки из-за его среднего оттенка с красным оттенком. Сосновая доска с этой морилкой выглядела наименее естественно. Тополь был немного похож на арбуз. Береза ​​на удивление хорошо себя показала, а дубы были натуральными.Натуральные в очень красном ключе.

    4. Minwax Golden Oak. Это еще один цвет морилки среднего диапазона, но с более нейтральным основным оттенком. Вместо того, чтобы древесные зерна приобрели красноту, вы можете видеть, что все они стали очень нейтрального коричневого цвета. Существует очень небольшая разница между кондиционированным и некондиционированным белым и красным дубом, но три других определенно выиграли от кондиционера перед окрашиванием.

    5. Minwax Jacobean. Первая из темных красок, которую мы попробовали, была также более нейтральной по тону.Он дает насыщенные темно-коричневые тона. Каждая порода древесины значительно выиграла от кондиционера с этой морилкой. Сосна стала более серой, чем что-либо еще.

    6. Minwax Dark Walnut. И последнее, более красное из двух темных пятен, с которыми мы экспериментировали. Хотя с сосной красный цвет вообще не прошел. На самом деле он выглядел почти розово-серым. Другая древесина хорошо приняла пятно, с большей краснотой на обработанных сторонах досок. Зеленый цвет на доске из тополя стал почти черным, как в якобинской морилке — очень красиво.

    И, наконец, мы подумали, что было бы полезно увидеть на одном изображении один и тот же тип дерева с разными пятнами. Мы надеемся, что это поможет вам увидеть, как оттенки сосны, березы, тополя, белого дуба и красного дуба играют с различными оттенками морилки.

    Как я уже сказал, я хотел бы сделать еще 15 таких! Но я надеюсь, что это полезно. Я думаю, что каждая порода дерева выглядела великолепно с одними пятнами и некачественно с другими.

    Я любил сосну со светлыми и темными пятнами, но не со средними пятнами.
    Береза ​​качала Просто Белый и Золотой Дуб.
    Тополь выглядел потрясающе почти во всех, кроме Золотого пекана.
    Белый дуб не может сделать плохой снимок.
    И Красный дуб, вероятно, должен держаться подальше от вещей, которые добавляют ему еще больше красного (например, Маринованный дуб и Золотой пекан).

    По-моему, конечно. Что ты думаешь!?

    МАГАЗИН ПОЧТ:

    JavaScript в настоящее время отключен в этом браузере. Повторно активируйте его, чтобы просмотреть этот контент.

     

     

    Окрашивание для гистологии | ДермНет NZ

    Автор: Брайан Ву, доктор философии.Кандидат медицинских наук, Медицинская школа Кека, Лос-Анджелес, США; Главный редактор: д-р Аманда Окли, дерматолог, Гамильтон, Новая Зеландия, июль 2015 г.


    Что такое гистологические пятна?

    Гистология и гистопатология образцов биопсии важны для диагностики кожных заболеваний. Они часто используются для обнаружения и диагностики рака кожи.

    • Гистология относится к изучению отдельных частей и структур, составляющих клетку, и взаимосвязи между структурой и функцией.
    • Гистопатология относится к изучению аномальных или пораженных тканей.

    Гистологические красители используются для окрашивания различных структур внутри клеток.

    Обработка ткани

    Перед окрашиванием предметного стекла ткань необходимо подготовить и поместить на предметное стекло.

    Парафиновая техника является наиболее распространенным способом подготовки гистологического предметного стекла и включает следующие этапы:

    • Образец ткани повторно срезается и фиксируется на предметном стекле
    • Образец обезвоживают, затем заливают воском (парафином)
    • Ткань разрезана и закреплена
    • Образец ткани очищается, затем окрашивается
    • Затем ткань помещается на постоянное предметное стекло.

    Другие распространенные гистологические методы включают:

    • Замороженные срезы — образцы тканей замораживают, делают срезы и срезы холодным лезвием, затем окрашивают и исследуют
    • Полутонкий метод — ткани залиты средой, подобной эпоксидной смоле, что позволяет нарезать образец более тонкими срезами.

    Какие существуют типы гистологических красителей?

    Некоторые из наиболее распространенных типов пятен.

    Окрашивание H&E

    Это наиболее часто используемая комбинация для общего окрашивания образцов кожи, особенно полезная при диагностике и классификации рака.

    • Гемотоксилин окрашивает определенные части клетки, например ядро, в синий цвет
    • Эозин окрашивает другие части клетки, такие как цитоплазма, в красный или розовый цвет.

    Окрашивание муцином

    Окрашивание муцином лучше всего подходит для обнаружения и окрашивания мукополисахаридов. Примеры пятен муцина включают:

    • Альциановый синий
    • Муцикармин
    • Период кислоты-Шиффа (PAS).

    Меланиновые пятна

    Меланиновые пятна, как следует из названия, используются для окрашивания меланина и обычно используются для диагностики меланомы.Одним из типичных примеров окраски меланина является окраска Фонтана-Массона.

    Трихромные красители

    Трихромные красители используют комбинацию трех различных красителей для достижения эффекта. Они используются явно для окрашивания липидов. Общие трихромные пятна включают:

    • Трихром Гомори
    • Трихром Мэллори,
    • Суданские пятна. Один конкретный суданский краситель, известный как Red Oil O, часто используется для диагностики жировых эмболов в легких.

    Какие гистологические окраски наиболее распространены?

    В таблице ниже приведены примеры различных гистологических окрасок.

    Каковы преимущества и недостатки традиционной гистологии?

    Преимущества гистологии и гистологического окрашивания:

    • Один из наименее дорогих морфологических методов
    • Позволяет исследовать большие срезы образца ткани
    • Может быть получен относительно быстро и практически без риска для пациента
    • Предоставляет клиницистам необходимый диагностический инструмент и позволяет им исследовать внутреннюю структуру различных клеток и тканей.

    К недостаткам гистологии и гистологического окрашивания относятся:

    • Подготовка предметных стекол с использованием парафиновой техники может занять много времени; замороженные слайды готовятся быстрее, но это может повлиять на разрешение, особенно при использовании световой микроскопии
    • Метод подвержен человеческому фактору во время подготовки и анализа слайдов
    • Этот тип окрашивания может быть менее специфичным, чем специальные методы окрашивания, такие как иммуногистохимическое (ИГХ) окрашивание.
    • Иногда с помощью этого метода бывает сложно идентифицировать определенные типы клеток, что может повлиять на его ценность как диагностического инструмента.

     

    Ссылки

    • Визуализация клеток, Юго-западный центр экологических наук о здоровье, Университет Аризоны, 2015 г.
    • Окрашивание для гистологии. Мир гистологии. 2014.
    • Peckham, A. Справочник по гистологии.
Похожие записи

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.